Checklite ATP-eliminerende Kit til 250 analyser

CheckLite ATP Eliminating Kit bruges til mikrobielle biomasseundersøgelser baseret på ATP-målemetoden. Alle levende celler, herunder mikroorganismer, bruger ATP som energikilde. Derfor kan den samlede cellemasse bestemmes ved at måle bioluminescens ved hjælp af luciferase-reaktionen. Dette gøres normalt ved at udtrække ATP fra prøven ved hjælp af ATP-frigivende reagenser, som i CheckLite 250 Plus. Dette kræver dog, at det ekstracellulære ATP er lavt.
Et stort problem er dog, at ekstracellulært ATP kan være flere størrelsesordener højere i nogle prøver, hvilket forhindrer følsom påvisning af intracellulært ATP. ATP-eliminationsreagenset eliminerer ekstracellulær ATP til meget lave koncentrationer og muliggør målrettet påvisning af bakterier.

1 x 250 analyser

Testvarighed: 30-40 minutter
Opbevaring: 2-8 °C, MÅ ikke NEDFRYSES
Sætsammensætning
ATP-eliminerende reagens:
5 hætteglas rød-rosa mærket
Rekonstitutionsbuffer til ATP-eliminationsreagens:
5 hætteglas gul mærket

Forberedelse af reagens
ATP-eliminerende reagens holdes under vakuum i et rødligt pink-mærket hætteglas.
Hæld rekonstitutionsbufferen fra det gulmærkede hætteglas i det åbnede rød-rosa-mærkede hætteglas og lad det stå ved stuetemperatur i et par minutter.
Rør forsigtigt i hætteglasset, så der ikke dannes skum, før indholdet er helt opløst.
Rør ikke ved flaskens kant eller toppen af gummiproppen direkte med dine hænder, da dette nogle gange vil hæve reagensets blanke værdi.
Et hætteglas med ATP-eliminationsreagens kan anvendes til mere end 50 analyser under normale forhold.
Bemærkninger til håndtering af prøver
Koncentrationen af ATP i levende celler ændres hurtigt. Ekstraher derfor ATP fra cellerne eller frys cellerne umiddelbart efter prøvetagning. Selv under ekstraktion kan det være nødvendigt at hæmme eller ødelægge ATP-nedbrydende enzymer for at forhindre enzymer i at sænke ATP-koncentrationen.

Forbehandling af prøver
3.1. Faste prøver:
Behandl prøven med en stomacher eller en homogenisator, og brug derefter supernatanten til følgende måling.

3.2. Væskeprøver:
Når prøveopløsningen er uklar, farvet eller indeholder hæmmende ioner, såsom Cl-, fortyndes prøven efter behov.

ATP-nedbrydning af prøver
Læg 1 ml prøve i reagensglasset.
Tilsæt 0,1 ml ATP-eliminationsreagens til reagensglasset og bland godt.
Lad reagensglasset stå ved stuetemperatur i 30 til 40 minutter. Det er vigtigt at holde reaktionstiden konstant for at opnå god reproducerbarhed. Hvis du tester flere prøver, skal hvert prøverør have stuetemperatur i samme tidsrum.
Efter reaktion ved stuetemperatur ovenfor anvendes prøverne til nedenstående bioluminescensanalyse.